大鼠食管上皮细胞

【简介】

管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。

【材料】

成年豚鼠、手术剪、手术镊、75%酒精、双抗、FBS、培养皿、15ml离心管、DMEM、PBS、D-Hanks、胰酶；

【方法】

1）处死大鼠，取食管组织，去除肌肉层，PBS清洗；

2），将上皮层组织剪成1mm×1mm×1mm组织碎片,加入0.1%I型胶原酶消化2-4h；

3）消化液浑浊后终止消化，过200目细胞网筛，1000rpm，5min离心，去上清，沉淀重复离心2次；

4）细胞沉淀种明胶包被的培养皿中，隔天换液；

【培养】

上皮细胞专用培养液

【鉴定】

1）免疫荧光：

阳性：CK18