大鼠气管平滑肌细胞

【简介】

大鼠支气管平滑肌细胞分离自支气管组织；支气管(Bronchi)，是指由支气管分出的各级分枝，由支气管分出的一级支气管，即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较，前者较细长，走向倾斜；后者较粗短，走向较前者略直，所以经支气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和支气管还有以区别就是，支气管是以“C”型的支气管软骨为支架，而支气管不是。支气管平滑肌细胞主要功能：①支气管平滑肌细胞能维持支气管张力，保持支气管形态；②支气管平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是支气管正常生理功能的基础；③支气管平滑肌通过分泌细胞因子和趋化因子等促炎介质，发挥免疫调节功能。支气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

平滑肌（细胞）虽有如斧足类的闭壳肌和足系牵引肌等是由平行走向长纤维状细胞（平滑肌纤维）所构成，但多数的平滑肌则是由长纺锤形（脊椎动物的内脏肌长不到1毫米）的单核细胞构成；

【材料】

培养皿，手术剪，弯头手术镊，10%FBS的DMEM，双抗PBS或Hanks，75%酒精；

【方法】

1）75%酒精浸泡SD大鼠；

2）开脖颈、胸腔，取出气管，泡双抗PBS；

3）去除食管和其他组织，从软骨环一侧剪开气管，弯头镊子横向刮气管内外层，留中层平行条纹的气管平滑肌组织；

4）组织移入含培液EP管，剪碎组织漂洗，800R/3min离心，重复3次；

5）取组织块贴壁于培养皿，干贴1-2h,补上培液37°培养；

【培养】

DMEM培养基（10%FBS）

图为SD大鼠气管平滑肌细胞P1代

【鉴定】

免疫荧光：

阳性：Desmin、α-SMA；