大鼠胃Cajal间质细胞

 【简介】

大鼠胃肠道Cajal间质细胞分离自胃肠道组织；胃肠道指的是从胃至肛门的消化管，包括胃、小肠、大肠等部位。其中肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。胃肠道是消化系统的主要器官，它会摄取足够的水和人体所必需的营养物质关节腔内的所有结构。ICC 分布于环行肌细胞之间,环行肌层的内表面及环行肌层与纵行肌层之间，该细胞往往与神经纤维末梢及神经束伴随存在，并由许多的缝隙连接紧密连接在一起。存在于肌细胞之间的Caial间质细胞的形状较圆，存在于环行肌层内表面的Caial间质细胞的形状则为细长形。ICC是胃肠道慢波活动的起搏器和传导者,在神经肌肉信号传递中起调节作用，且与某些胃肠动力性疾病的发生有相关性。

【材料】

成年大鼠、手术剪、手术镊、75%酒精、双抗、两性霉素、FBS、培养皿、15ml离心管、M199、PBS、D-Hanks、酶消化液（0.1%II型胶原酶、ATP、胰蛋白酶抑制、SCF（干细胞生长因子）、Ficoll 400；）

【方法】

1）处死大鼠，取胃窦组织，去除粘膜层和粘膜上皮D-Hanks清洗。

2）将胃肌条组织剪成1mm×1mm×1mm组织碎片,加入酶液消化60min。

3）消化液浑浊后终止消化，过200目细胞网筛，1000rpm，10min离心，去上清。沉淀重复离心2次。

4）加入Ficoll 400，梯度分离，纯化细胞。

4）细胞沉淀种明胶包被的培养皿中，48h换液。

【鉴定】

1）免疫荧光：

阳性：c-kit